GRUPO NUCEL DE TERAPIA CELULAR E MOLECULAR

Técnico em Controle Ambiental /Meio Ambiente pelo Instituto Federal de Educação, Ciência e Tecnologia do Rio Grande do Norte (2008). Graduado em Ciências Biológicas (Licenciatura e Bacharelado) pela Universidade Federal do Rio Grande do Norte – UFRN (2011). Mestre em Bioquímica e Biologia Molecular pela UFRN (2014). Atualmente, é doutorando do Programa de Pós-Graduação em Bioquímica do Instituto de Química da Universidade de São Paulo, em parceria com o Núcleo de Terapia Celular e Molecular (NUCEL). Possui experiência nas áreas de Embriologia e Anatomia Humana, atuando nos seguintes temas: caracterização morfo-fisiológica de cordões umbilicais de cães e histologia de sistemas embrionários; nas áreas de Bioquímica, Biologia Celular e Molecular, atuando nos seguintes temas: purificação/caracterização cinética de enzimas, metagenômica de ambientes extremos e identificação/caracterização funcional de marcadores moleculares (superexpressão e nocauteamento via sistema de edição gênica CRISPR/Cas9) em linhagens celulares humanas de câncer de mama.

O câncer de mama é o tipo de câncer mais comumente detectado em mulheres no Mundo [1], sendo considerado um grave problema de Saúde Pública Global, cujo diagnóstico precoce e correto ainda é a principal maneira de evitar a progressão da doença.  O uso de moléculas como marcadores tumorais vem auxiliando o clínico no diagnóstico preditivo, na avaliação do prognóstico e, até mesmo, no tratamento do câncer de mama, sendo essencial na diminuição das altas taxa de mortalidade ocasionadas pelo espalhamento da doença para outras regiões do corpo, principalmente, os ossos. No entanto, apenas um pequeno grupo de marcadores tumorais são inteiramente confiáveis, estimulando à busca por novos alvos, e sua caracterização funcional, como forma de melhor se entender a Biologia e as bases moleculares desta doença. 

Baseado na análise da expressão gênica e em experimentos de ganho e perda de função, nosso grupo de pesquisa vem desenvolvendo projetos que visam descobrir a relação de genes codificadores e não codificadores de proteína tanto com a manutenção da normalidade das células, quanto com a progressão do fenótipo tumoral, auxiliando, desta forma, no desenvolvimento de novos protocolos clínicos e terapêuticos. Em uma das linhas de pesquisa do grupo, voltada para genes codificadores de proteínas, descrevemos os marcadores proteicos CD90 e CD14 como sendo diferencialmente expressos em linhagens celulares humanas de câncer de mama [2], podendo estar relacionados com o grau de malignidade da doença, constituindo, portanto, interessantes alvos a serem estudados. Experimentos de caracterização funcional do marcador CD90 já foram realizados [3], enquanto os do marcador CD14 estão em andamento. 

Por outro lado, estudos que relacionem a expressão de genes não-codificadores de proteínas e a malignização de tumores de mama ainda são escassos na literatura, tornando-os também interessantes alvos para estudo. 

Em uma outra linha de pesquisa do grupo, voltada para genes não codificadores de proteínas, identificamos cerca de 10 RNAs longos não codificadores de proteínas (lncRNAs) diferencialmente expressos em linhagens celulares humanas de câncer de mama. Um deles, o LINC01133, foi selecionado para experimentos de caracterização funcional, tendo se observado aumento da malignidade nas linhagens geradas (Figura 1), tanto na linhagem não-tumorigênica MCF10A, na qual super-expressamos este marcador de forma induzida, quanto na linhagem tumorigênica Hs578T, na qual nocauteamos o marcador via sistema de edição gênica CRISPR/Cas9 (dados ainda não publicados). Portanto, os projetos que desenvolvemos em nosso grupo tem como objetivos:

 1) Identificar e analisar a expressão gênica, via qRT-PCR, de novos genes codificadores e não-codificadores de proteínas num painel de linhagens celulares humanas de câncer de mama, que apresentam diferentes graus de malignidade;

2) Selecionar novos alvos e caracterizá-los funcionalmente através de experimentos  de  ganho  e  perda  de  função, visando descobrir a relação destes alvos tanto com a manutenção da normalidade das células, quanto com a progressão do fenótipo tumoral;

3) Caracterizar funcionalmente o mecanismo de ação dos novos alvos no modelo de progressão tumoral por RNA-Seq e Western Blotting;

Figura 1: Análise do potencial invasivo em células Hs578T nocauteadas do lncRNA LINC01133. Fotos representativas referente à cada linhagem celular ao final do experimento, em campo de contraste de fase e reveladas com DAPI.

REFERÊNCIAS

[1] BRAY, Freddie et al. Global cancer statistics 2018: GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries. CA: a cancer journal for clinicians, v. 68, n. 6, p. 394-424, 2018.

[2] LOBBA, A. R. M. et al. Differential expression of CD90 and CD14 stem cell markers in malignant breast cancer cell lines. Cytometry Part A, v. 81, n. 12, p. 1084-1091, 2012.

[3] LOBBA, Aline Ramos Maia et al. High CD90 (THY-1) expression positively correlates with cell transformation and worse prognosis in basal-like breast cancer tumors. PloS one, v. 13, n. 6, p. e0199254, 2018.